微生物菌種的培養(yǎng): ⒈ 孢子制備 ⑴ 孢子的制備 一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。 ⑵ 霉菌孢子的制備 霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。 ⒉ 種子制備 ⑴ 搖瓶種子制備 搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。 產(chǎn)品名稱:北京擲孢酵母 貨號(hào):YS-01J12384 拉丁文: Sporobolomyces│beijingensis 分離基物: Athyrium kusnezoffii 提供形式: 凍干物 安全等級(jí): 1 模式菌株: no 培養(yǎng)基: 0013 生長(zhǎng)條件: 17℃ 存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) | 北京擲孢酵母說(shuō)明書 | Sporobolomyces│beijingensis | YS-01J12384 |
公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說(shuō)明: 1、安瓿瓶開封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。 2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。 3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng) 4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。 5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。 保存方法: 傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。 液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。 懸液保存法: ① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。 ② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。 載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。 常用的冷凍保存法: ① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。 ② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。 ③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。 微生物培養(yǎng)方法: 1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。 2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。 上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟: a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。 b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。 c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。 豬白蛋白ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 豬γ干擾素(IFN-γ)花生四烯酸15脂氧合酶1抗體 豬γ淀粉酶(AMY)癌增強(qiáng)蛋白2抗體 豬β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)α1微球蛋白抗體 豬β內(nèi)啡肽(β-EP)α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體 豬α干擾素(IFN-α)AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 豬αN乙酰葡糖糖苷酶(NAGLU)致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 豬α1酸性糖蛋白(α1-AGP)腺苷脫氨酶抗體 豬Tau蛋白含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族4抗體 豬Syndecan-1/CD138(SDC1)ATRNL1蛋白抗體 豬S100B蛋白(S-100B)AFP4a蛋白抗體 豬p物質(zhì)(SP)鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 豬P450膽固側(cè)鏈裂解酶(P450scc)鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體 豬N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 北京擲孢酵母說(shuō)明書鼠李糖小短桿菌腎上腺髓質(zhì)素受體抗體 Entecavir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 釀酒酵母脂聯(lián)素抗體 Epalrestat 質(zhì)量規(guī)格:>99% 分枝桿菌腎上腺髓質(zhì)素抗體 Epirubicin HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 蒙古口蘑腺苷受體A3抗體 Epirubicin HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 產(chǎn)氣莢膜梭菌 素C型ADRA2腎上腺素能受體2抗體 Eptifibatide Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 鏈霉菌腎上腺素能受體β1抗體 Erlotinib hcl 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng) 凍土毛霉腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體 Erlotinib hcl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 樟疫霉晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 Ertapenem sodium 質(zhì)量規(guī)格:含量>90%,單鈉鹽
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