產(chǎn)品名稱:總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒(ABTS法)品牌 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號:GOY-016332 檢測方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:氧化應(yīng)激系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 大腸桿菌化妝品氨一步法定量檢測試劑盒70kDa熱休克1樣(HSPA1L)檢測試劑盒 釀酒酵母通用型直鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒泛結(jié)合E2A(UBE2A)檢測試劑盒 磚紅鐮刀菌食物直鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測試劑盒 黃曲霉植物直鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒多巴色異構(gòu)(DT)檢測試劑盒 赫氏埃希氏菌通用型支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒YY肽(PYY)檢測試劑盒 乳桿菌屬食物支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒多藥耐藥關(guān)聯(lián)1(MRP1)檢測試劑盒 戊糖乳桿菌植物支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒二腺苷(ADP)檢測試劑盒 馬紅球菌通用型總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒類胰(TPS)檢測試劑盒 微小根毛霉食物總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒胃泌釋放肽前體(ProGRP)檢測試劑盒 蟬花1-13(可訂)植物總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒強(qiáng)啡肽(Dyn)檢測試劑盒 肺形側(cè)耳(鳳尾菇)果汁阿拉伯多糖比色法定量檢測試劑盒160kDa核孔(NUP160)檢測試劑盒 假單胞菌屬酒類精氨比色法定量檢測試劑盒去唾液糖受體1(ASGPR1)檢測試劑盒 絨蓋干酪菌飲料精氨比色法定量檢測試劑盒胎盤泌乳(PL)檢測試劑盒 揚(yáng)奇青霉乳品酪比色法定量檢測試劑盒特異性β1-糖(PSG1)檢測試劑盒 里氏木霉食品添加劑酪比色法定量檢測試劑盒溶菌(LZM)檢測試劑盒 香菇果菜抗壞血比色法定量檢測試劑盒膠質(zhì)成熟因子γ(MPFγ)檢測試劑盒 嗜線蟲致病桿菌食物抗壞血比色法定量檢測試劑盒98kDa核孔(NUP98)檢測試劑盒 松口蘑酒類抗壞血比色法定量檢測試劑盒軟骨寡聚基質(zhì)(COMP)檢測試劑盒 人參土地桿菌飲料抗壞血比色法定量檢測試劑盒鋅指同源框4(ZFHX4)檢測試劑盒 飲料抗壞血比色法定量檢測試劑盒88kDa核孔(NUP88)檢測試劑盒 總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒(ABTS法)品牌激A檢測試劑盒E3連接MMS21抗體 激C檢測試劑盒環(huán)指60抗體 激G檢測試劑盒肌球輕鏈7抗體 酪氨1B檢測試劑盒心臟肌球結(jié)合抗體 激活受體2檢測試劑盒肌球重鏈9抗體 低密度脂檢測試劑盒髓系/淋巴或混合型白血病11抗體 低密度脂膽固檢測試劑盒干擾誘導(dǎo)GTP結(jié)合MX2抗體 低密度脂受體檢測試劑盒上皮抗原BA46抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |