PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
二甲基二硫代氨酸鋅(>95.0%(T))GSTP1 (3F2) Mouse mAb異噻唑啉酮

并紅紫4B[pH指示劑]Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) Antibody5-溴-2,二氟甲

間甲酚紫鈉鹽[pH指示劑]Phospho-Erk5 (Thr218/Tyr220) Antibody硝基芐鹽酸鹽

五甲氧基紅(>98.0%(HPLC))Phospho-Erk5 (Thr218/Tyr220) Antibody溴芐鹽酸鹽

甲基橙(>95.0%(W))Erk5 Antibody6-氯-1-羥基并三氮唑

溴氯酚藍(lán)[pH指示劑]Cathepsin B (G60) Antibody6-溴煙酸甲酯

乙基橙[pH指示劑]TrkC (C44H5) Rabbit mAb6-甲氧基煙酸甲酯

乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))SimpleChIP® Human HUWE1 Intron 26 Control Primers三環(huán)己基膦

2,5-二酚(加約20%水濕潤,本品干重約為5g)(>99.0%(T))Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb2-甲

間二酚藍(lán)[pH指示劑]Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb乙酸薄荷酯

2-酚鈉鹽(>99.0%(HPLC)(T))PCAF (C14G9) Rabbit mAbalpha-溴-甲氧基乙酮

甲酚紅鈉鹽[pH指示劑]PCAF (C14G9) Rabbit mAb2-疏基吡啶

雙(2,二)乙酸乙酯(>98.0%(HPLC))PRMT4/CARM1 (C31G9) Rabbit mAb4,4'-偶氮雙(基戊酸)

(1R,2R)-2-(萘-2,二甲酰亞基)環(huán)己甲酸(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser890) AntibodyH-ORN(CBZ)-OH

(1S,2S)-2-(萘-2,二甲酰亞基)環(huán)己甲酸(>98.0%(HPLC)(T))NHERF1 (A140) Antibody2,5-二氟甲

(1S,2S)-2-(蒽-2,二甲酰亞基)環(huán)己甲酸(>97.0%(HPLC))

Cathepsin B (H190) Antibody (Mouse Preferred)甲基環(huán)戊二二聚體

Nα-(5-氟-2,二基)-L-亮氨酰(>98.0%(HPLC))Phospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser896) AntibodyN-芐氧羰基-L-谷氨酰

Nα-(2,二硝基-5-氟基)-D-亮氨酰銨(>98.0%(HPLC))Phospho-NMDA Receptor 1 (GluN1) (Ser897) Antibody硝基吡唑
鯉皰疹病毒通用探針法熒光PCR檢測試劑盒性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒Parvalbumin  細(xì)小清蛋白抗體20 ul

性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒PTTG  垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體1Kit

性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒Peptide YY/PYY  酪酪肽抗體100 ul

甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒Rad17  細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體100 ul

甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒Phospho-Rad17 (Ser645)  酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體100 ul

甲狀腺球蛋白IgG抗體ELISA試劑盒Rad51  Rad51抗體20 ul

甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒Rad52  Rad52抗體100 ul

甲狀腺過氧化物酶(TPO)IgG抗體ELISA試劑盒RAD51C  癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體100 ul

甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒RAP1A  抗Rap1A抗體100 ul