產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱:Guaratuba VirusRTPCR 編號:HE31039-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 鈹試劑II/8-羥基萘-3,6-二磺酸(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羥基萘-3′,6′-二磺酸四鈉鹽/H酸偶氮變色酸鈉/2-(8-羥基萘-3,6-二磺酸鈉偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸鈉/Beryllon II 質量規格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;1g 石墨粉/黑鉛/筆鉛/半石墨/不純石墨/墨鉛/炭精/石墨潤滑劑/膠體石墨/導電敷層/Graphite powder 質量規格:>98.0%(T) 包裝;500mg 人造沸石/交替砂/軟砂/變通質/沸石/Permutit 質量規格:>92.0%(T) 包裝;100mg 鈉石灰/蘇打石灰/堿石灰/蘇打石灰混合物/鈉鈣玻璃/Soda lime 質量規格:>99.0%(GC) 包裝;1g 海砂/石英玻璃/Sea sand 質量規格:>95.0%(HPLC)(T) 包裝;25g 脂質體2000/Lipofectamine 2000 Transfection Reagent 質量規格:>98.0%(HPLC) 包裝;5g 辛可寧/弱金雞鈉堿/4-喹啉基(5-乙烯基-1-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-2-基)甲醇/金雞寧/辛可尼/Cinchonine 質量規格:>98.0%(HPLC) 包裝;1g 羅丹寧/銀試劑/羅丹酸/2-硫代-4-噻唑烷酮/繞丹寧/2-硫代-2,4-噻唑烷二酮/2-硫-4-氧四氫噻唑/Rhodanine 質量規格:>98.0%(GC)(T) 包裝;25g N-甲基吩嗪甲基硫酸鹽/N-甲基二苯并吡嗪甲基硫酸鹽/吩嗪二甲酯硫酸鹽/5-甲基吩嗪硫酸甲酯/吩嗪硫酸甲酯/甲硫吩嗪/硫酸甲酯吩嗪/PMS 質量規格:>98.0%(N)(T) 包裝;5g 草酸二乙酯/乙二酸二乙酯/草酸乙酯/二乙基草酸/Diethyl oxalate 質量規格:>97.0%(GC) 包裝;10g /精/粒/Iodine 質量規格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記 包裝;50g 紅色硫化汞/朱砂/銀朱/硫化汞/硫化汞(II)/辰砂/丹砂/Chinese red 質量規格:>99.0%(GC) 包裝;25g 三苯基氧化膦/三苯基氧膦/2-乙醇/三苯基磷氧/氧化三苯磷酸/氧化三苯膦/Triphenylphosphine oxide 質量規格:>98.0%(GC) 包裝;5g 皂土/膨潤土/漿土/膠狀黏土/斑脫巖/膠膨潤土/膠體粘土/膠質粘土/高鈉膨潤土/泥漿膨潤土/班脫巖/Bentonite 質量規格:用于薄層色譜顯色劑 包裝;5g 漂白土粉/漂洗泥/Floridin 質量規格:>99.0%(GC) 包裝;5g 碳化硼/Boron carbide 質量規格:99.8原子%D 包裝;100g 三氧化二硼/氧化硼/硼酐/三氧化硼/硼酸酐/Boron oxide 質量規格:>98.0%(T) 包裝;25g 瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒Anoxybacillus│flavithermus 中文名稱:好熱黃無氧芽孢菌種屬:Anoxybacillus│flavithermus分離基物:樣/上層海提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/高溫菌(55℃)培養方法培養基:471生長條件:55℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Bacillus│halodurans 中文名稱:耐鹽芽胞桿菌種屬:Bacillus│halodurans分離基物:樣/表層溫泉提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/高溫菌(60℃)培養方法培養基:471生長條件:60℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Exiguobacterium│arabatum 中文名稱:微小桿菌(加詞待譯)種屬:Exiguobacterium│arabatum分離基物:樣/表層海提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:深海細菌培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Microbacterium│sediminis 中文名稱:沉積物微桿菌種屬:Microbacterium│sediminis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:;微生物/耐冷、耐熱、耐鹽微生物培養方法培養基:221生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Altererythrobacter│epoxidivorans 中文名稱:食環氧化物交替赤細菌種屬:Altererythrobacter│epoxidivorans分離基物:土樣/生活區土樣提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選;4.海洋微生物生態學研究。培養方法培養基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Rhodococcus│qingshengii 中文名稱:樊慶生紅球菌種屬:Rhodococcus│qingshengii分離基物:土樣/生活區土樣提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選;4.海洋微生物生態學研究。培養方法培養基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Nocardioides│furvisabuli 中文名稱:黑沙類諾卡氏菌種屬:Nocardioides│furvisabuli分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選;4.海洋微生物生態學研究。培養方法培養基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Arthrobacter│humicola 中文名稱:居土節桿菌種屬:Arthrobacter│humicola分離基物:沉積物/湖邊沉積物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選;4.海洋微生物生態學研究。培養方法培養基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |