實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 黃桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | 英文名稱 | Flavobacterium spp.PCR | 貨號(hào) | HE30989-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 無(wú)碳酸鈉/碳酸鈉/純堿/蘇打/食用純堿/炭氧/Sodium carbonate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:酶活:>200 NADP units/mg,BC 包裝;100g 碳酸氫鈉/重碳酸鈉/酸式碳酸鈉/小蘇打/重曹/焙堿/Sodium hydrogen carboante 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 結(jié)晶硫酸鈉/芒硝/硫酸鈉/十硫酸鈉/芒硝礦/晶硝/Sodium sulfafe decahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR 包裝;500g 無(wú)硫酸鈉/無(wú)芒硝/元明粉/85硝/鹽餅/硬脂鈉/Sodium sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 結(jié)晶亞硫酸鈉/硫養(yǎng)粉/Sodium sulfite heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 無(wú)亞硫酸鈉/亞硫酸鈉/硫養(yǎng)粉/硫化石/Sodium sulfite anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 亞硫酸氫鈉/重亞硫酸鈉/酸式亞硫酸鈉/Sodiumhydrogen sulfite 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 硫代硫酸鈉/大蘇打/硫代硫酸鈉五合物/脫氯劑/五合硫代硫酸鈉/一硫硫酸鈉/海波/Sodium thiosulfate pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:BC 包裝;5g 無(wú)硫代硫酸鈉/無(wú)大蘇打/無(wú)次亞硫酸鈉/次亞硫酸鈉/硫代硫酸鈉/硫代硫酸二鈉/硫代硫酸二鈉鹽/海波/Sodium thiosulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 磷酸二氫鈉一物/磷酸一鈉單合物/一鹽基磷酸鈉一物/Sodium dihydrogen phosphate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 磷酸二氫鈉二物/磷酸一鈉二物/一鹽基磷酸鈉二物/酸性磷酸鈉/Sodium phosphate monobasic dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 無(wú)磷酸二氫鈉/磷酸一鈉/MSP 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 磷酸氫二鈉/磷酸二鈉/二鹽基磷酸鈉/十二合磷酸氫二鈉/十二磷酸二鈉/十二磷酸氫二鈉/雙鹽基磷酸鈉/Sodium phosphate dibasic dodecahydrate 質(zhì)量規(guī)格:4000~6500 mpa.s,BR 包裝;100g 磷酸氫二鈉七物/七合磷酸二鈉/七合二鹽基磷酸鈉/七合磷酸氫二鈉/SSodium phosphate dibasic heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%(TLC),BR 包裝;25g 無(wú)磷酸氫二鈉/無(wú)磷酸二鈉/磷酸二鈉/二鹽基性磷酸鈉/Sodium phosphate dibasic 質(zhì)量規(guī)格:>98%(HPLC),BR 包裝;5g 磷酸三鈉/正磷酸鈉/十二磷酸鈉/磷酸三鈉十二合物/TSP 質(zhì)量規(guī)格:>98%,醫(yī)藥級(jí) 包裝;100g 無(wú)磷酸三鈉/三堿式磷酸鈉/原磷酸三鈉/磷酸三鈉/磷酸鈉/Trisodium phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BR 包裝;25g 黃桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書海洋微生物菌種海洋微生物菌種海洋微生物菌種 純度:98% Dothideomycetes│sp. 中文名稱:座囊菌種屬:Dothideomycetes│sp.分離基物:樣/深層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:475生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Brachybacterium│paraconglomeratum 中文名稱:副凝膠短狀桿菌種屬:Brachybacterium│paraconglomeratum分離基物:沉積物/多管沉積物(5-10cm)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Microbacterium│trichotecenolyticum 中文名稱:解單端孢菌素微桿菌種屬:Microbacterium│trichotecenolyticum分離基物:沉積物/日本海溝沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/潛在的抗腫瘤活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1003生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Comamonas│denitrificans 中文名稱:脫氮叢毛單胞菌種屬:Comamonas│denitrificans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)污染物降解菌/苯酚、間甲酚降解菌(已驗(yàn)證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Vibrio│harveyi 中文名稱:哈氏弧菌(原:鯊魚弧菌)種屬:Vibrio│harveyi分離基物:生物樣/鯊魚的腎提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:參考菌株/分類研究;本菌株是鯊魚弧菌(Vibrio carchariae)的模式菌株:,鯊魚弧菌現(xiàn)組合為哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Citrobacter│murliniae 中文名稱:嚙齒類檸檬酸桿菌種屬:Citrobacter│murliniae分離基物:生物樣/暗紋東方鲀/肝臟提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/暗紋東方鲀肝臟共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Weissella│cibaria 中文名稱:食物魏斯氏菌種屬:Weissella│cibaria分離基物:生物樣/魚腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物活性物質(zhì)篩選; 2.魚腸道微生態(tài)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% ? |