產(chǎn)品名稱:糞腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 英文名稱:Enterococcus faecalis PCR 編號(hào):HE30938-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 堿性木素/利格寧/木質(zhì)素/硫酸木素/牛皮木素/石成木素/對(duì)氮蒽藍(lán)/引杜林/醋酯藍(lán)/木質(zhì)素磺酸鹽減劑/Lignin alkalie 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 噻唑橙/Thiazole Orange 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 2-氨基吖啶酮/AMAC 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 金黃三羧酸/金精三羧酸/ATA 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 硫黃素T/堿性黃1/硫代磺素T/氯化2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑翁/硫代黃色素T/鹽基嫩黃/2-[4-(二甲基氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑鎓氯化物/硫磺素T/Thioflavin T 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 硫磺素S/四羥酮醇S/硫代磺素S/硫代黃色素S/直接黃7/Thioflavine S 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g β-萘酚紫/4-[[4-(苯甲酰氨基)-2-甲氧基-5-甲基苯基]偶氮]-3-羥基-N-苯基-2-萘甲酰胺/β-Naphthol Violet 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;250mg N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基鈉鹽/ADPS 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 3,3'5,5'-四甲基聯(lián)丙磺酸鈉/N-(3-磺丙基)-3,3',5,5'-四甲基聯(lián)鈉鹽/TMB丙磺酸鈉/TMB-PS 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g 1,2-茚滿二酮/1,2(3H)-氫化茚二酮/茚二酮/1,2-IND 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 4-芐基氨基-7-并氧雜惡二唑/4-芐氨基-7-并-2-氧雜-1,3-二唑/4-芐基氨基-7-并-2-氧雜-1,3-二唑/BBD 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5MG 4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,4-三氮唑/4-氨基聯(lián)基巰基-1,2,4-三氮雜茂/4-氨基-3-肼-5-巰基-1,2,4-三唑/4-氨基-3-肼基-5-巰基-1.2.4-三唑/4-氨基-3-聯(lián)氨-5-巰基-1.2.4三氮雜茂/4-氨基-5-肼基-1,2,4-三唑-3-硫醇/AHMT 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g N-(4-氨基丁基)-N-乙基異魯米諾/4-(N-乙基-N-氨基丁基氨基)鄰苯二甲酰肼/N-(4-氨丁基)-N-乙基異魯米諾/6-[N-(4-氨基丁基)-N-乙氨基]-2,3-二氫-1,4-鄰苯二甲酰肼/N-(4-氨丁基)-N-乙基異傘醇/ABEI 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;250mg 1,3-茚二酮/1,3-二酮?dú)滠?1,3-氫化茚二酮/2,3-二氫-1,3-茚二酮/氫化茚-1,3-二酮/1,3-茚滿二酮/二氫茚二酮/1,3-Indanedione 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 釕紅/氧化氯釕/氯氧釕(III)/Ruthenium Red 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 維生素C/抗壞血酸/維他命C/L-抗壞血酸/丙種維生素/2,3,4,5,6-五羥基-2-酸-4-內(nèi)酯/VC 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 維生素C鈉/L-抗壞血酸鈉/VC鈉鹽/L(+)-蘇糖型-2,3,4,5,6-五羥基-2-酸-4-內(nèi)酯鈉/維他命C鈉/Sodium ascorbate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g 糞腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Salmonella│paratyphi A var.durazzo 中文名稱:甲型副傷寒沙門氏菌杜雷佐變種種屬:Salmonella│paratyphi A var.durazzo提供形式:其他安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:2,12 a -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Salmonella│schleissheim 中文名稱:胥萊士亥姆沙門氏菌種屬:Salmonella│schleissheim提供形式:其他安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4,12,27 b -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Salmonella│sandiego 中文名稱:圣地亞哥沙門氏菌種屬:Salmonella│sandiego提供形式:其他安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4,12 e,h e.n,z15培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Salmonella│sp. 中文名稱:沙門氏菌種屬:Salmonella│sp.提供形式:其他安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4,5,12 e,h -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Salmonella│essen 中文名稱:埃森沙門氏菌種屬:Salmonella│essen提供形式:其他安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4,12 g,m -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:1M in THF Salmonella│abortus-equi 中文名稱:馬沙門氏菌種屬:Salmonella│abortus-equi提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4,12 - e,n,x培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:1M in THF Salmonella│thompson var.berlin 中文名稱:湯卜遜沙門氏菌柏林變種種屬:Salmonella│thompson var.berlin提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6,7 - 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:1M in THF Salmonella│virchow 中文名稱:維爾肖沙門氏菌種屬:Salmonella│virchow提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6,7 r 1,2培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% |