產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:鴨乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒規格 英文名稱:Duck Hepatitis B Virus(DHBV)PCR 編號:HE30900-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 尿苷二磷酸葡萄糖/尿苷-5ˊ-二磷酸葡糖二鈉鹽/葡萄糖-5ˊ-二磷酸尿苷二鈉鹽/二磷酸尿苷葡萄糖二鈉鹽/UDP-Glc/UDPG 質量規格:含量測定 包裝;1g 鳥苷/鳥嘌呤核苷/鳥嘌呤核甙/9-β-D-呋喃核苷鳥嘌呤/9-β-D-呋喃核糖基鳥嘌呤/鳥甙/鳥糞苷/鳥糞素苷/鳥嘌呤呋喃核苷/Guanosine 質量規格:含量測定 包裝;1g 5-鳥苷一磷酸二鈉鹽/5′-鳥苷酸二鈉/5'-鳥甙酸二鈉/鳥苷酸二鈉/鳥苷-5'-磷酸二鈉鹽/5'-一磷酸鳥苷二鈉/5'-鳥嘌呤磷酸二鈉鹽/5′-GMP,2Na 質量規格:含量測定 包裝;100g 5-鳥苷二磷酸二鈉鹽/鳥苷-5'-二磷酸二鈉鹽/5'-鳥嘌呤核苷二磷酸二鈉鹽/5'-GDP,2Na 質量規格:供檢查用 包裝;25g 5-鳥苷三磷酸二鈉鹽/鳥苷-5'-三磷酸二鈉鹽/5'-鳥嘌呤核苷三磷酸二鈉鹽/5'-GTP,2Na 質量規格:含量測定 包裝;5g 5-鳥苷三磷酸三鈉鹽/鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽/5'-鳥嘌呤核苷三磷酸三鈉鹽/5'-GTP,3Na 質量規格:>98%,BR 包裝;25g 鳥苷-3',5'-環磷酸鈉鹽/3',5'-環一磷酸鳥苷鈉鹽/環磷鳥苷/鳥嘌呤核糖苷-3',5'-環磷酸酯/cGMP/3′,5′-cGMP-Na/cyclic GMP 質量規格:>98%,特異性的p110β抑制劑 包裝;5g 肌苷/次核苷/9-β-D-呋喃核糖基次/9-D-核糖次/次黃苷/肌甙/Inosine 質量規格:TLC法檢查 包裝;25g 5-肌苷一磷酸二鈉鹽/肌苷-5'-單磷酸二鈉鹽/5′-肌苷酸鈉/5-單磷酸次核苷二鈉/5′-IMP,2Na 質量規格:含量測定 包裝;5g 5-肌苷二磷酸二鈉鹽/肌苷-5'-二磷酸二鈉鹽/次核苷-5'-二磷酸二鈉/5′-IDP,2Na 質量規格:含量測定 包裝;1g 5-肌苷二磷酸三鈉鹽/肌苷-5'-二磷酸三鈉鹽/次黃苷-5ˊ-二磷酸三鈉鹽/次核苷-5ˊ-二磷酸三鈉鹽/5′-IDP,3Na 質量規格:TLC法檢查 包裝;5g 5-肌苷三磷酸三鈉鹽/肌苷-5'-三磷酸三鈉鹽/次黃苷-5ˊ-三磷酸三鈉鹽/次核苷-5ˊ-三磷酸三鈉鹽/5′-ITP,3Na 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g 5-肌苷三磷酸二鈉鹽/次核苷-5'-三磷酸二鈉/三磷酸肌苷二鈉/5′-ITP,2Na 質量規格:供檢查用 包裝;100g 三磷酸脫氧核糖核苷酸/脫氧核糖核苷-5′-三磷酸/寡核苷酸緩沖液/dNTPs 質量規格:供HPLC法含量測定用 包裝;25g 2′-脫氧腺苷/2′-脫氧腺甙/去氧胰苷/去氧腺嘌呤配糖/去氧腺核苷/脫氧腺嘌呤核苷/9-β-D-2ˊ-脫氧呋喃核苷腺嘌呤/2′-Da 質量規格:HPLC>98%,標準品 包裝;5g 2′-脫氧腺苷-5′-單磷酸/脫氧腺苷單磷酸/脫氧腺苷酸/dAMP 質量規格:含量測定 包裝;5ml 2′-脫氧腺苷-5′-單磷酸二鈉/脫氧腺苷單磷酸二鈉/脫氧腺苷酸二鈉/dAMP,2Na 質量規格:≥97%,BR 包裝;1g 鴨乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒規格 Pseudomonas│poae 中文名稱:草假單胞菌種屬:Pseudomonas│poae分離基物:市售產提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:耐鹽細菌,在10%NaCl培養基:中可生長。培養方法培養基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:>98.0%(GC) Pseudomonas│balearica 中文名稱:巴利阿里假單胞菌種屬:Pseudomonas│balearica分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:能于30℃、48小時降解約1000ppm的萘,萘為碳源(無機鹽培養基:)培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:>98.0%(GC) Chromohalobacter│israelensis 中文名稱:以色列色鹽桿菌種屬:Chromohalobacter│israelensis分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:能夠耐受15%的鹽培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:99% Virgibacillus│halodenitrificans 中文名稱:鹽脫氮枝芽孢桿菌種屬:Virgibacillus│halodenitrificans分離基物:鹽場土提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在10%NaCl培養基:上能夠生長。培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:99% Enterobacter│radicincitans 中文名稱:促根生腸桿菌種屬:Enterobacter│radicincitans分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在M9培養基:中抗普斯特的濃度達500mg/L。培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:99% Klebsiella│sp. 中文名稱:克雷氏桿菌種屬:Klebsiella│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在M9培養基:中抗普斯特的濃度達500mg/L。培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:98% Cellulosimicrobium│sp. 中文名稱:纖維微菌種屬:Cellulosimicrobium│sp.分離基物:污泥提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:98% Paenibacillus│alkaliterrae 中文名稱:耐堿類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│alkaliterrae分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:分類、研究,可以用來生物肥料。培養方法培養基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |