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陰溝腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-27
點擊次數:
723
產品特點:
陰溝腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T陰溝腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

陰溝腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Enterobacter cloacaePCR

 貨號

 HE30933-R

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢:
    1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
蒽酮/9,10-二氫-9-氧蒽/9(10H)-蒽酮/恩酮/9,10-二氫蒽-9-酮/Anthrone 質量規格:>95%,BR 包裝;1g

四丁基硫酸氫銨/硫酸氫四丁銨/四丁基硫氫酸銨/正四丁基硫酸氫基銨/四丁基氫銨/硫酸氫化四丁基/TBAHS/IPC-TBA-HS 質量規格:>95%,BR 包裝;250mg

4,4-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮/4,4-雙(二甲氨基)硫代二甲酮/硫代米氏酮/4,4′-四甲基二氨基硫代二苯甲酮/對,對′-四甲基二氨基二苯硫酮/4,4′-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮/4,4'-雙二甲氨基硫代二苯甲酮/硫代米蚩酮/雙[4-(二甲氨基)苯基]甲硫酮/4,4'-雙(二基)硫代苯甲酮/Thiomichler's ketone 質量規格:>95%,BR 包裝;1g

米氏酮/4,4′-四甲基二氨基二苯甲酮/米蚩酮/米氣勒氏酮/四甲對,對′-二氨二苯甲酮/4,4′-雙(二甲氨基)二苯酮/四甲基米氏酮/4,4'-二(N,N-二甲氨基)二苯甲酮/4,4’-二(N,N-二甲氨基)二苯酮/4,4’-雙(二甲氨基)二苯甲酮/雙二甲氨基苯甲酮/4,4′-雙(二甲氨基)苯甲酮/Michler's ketone 質量規格:>95%,BR 包裝;250mg

苯芴酮/鍺試劑/苯基芴酮/苯基熒光酮/2,6,7-三羥基-9-苯基熒光酮/2,6,7-三羥基-9-苯基-3H-呫噸-3-酮/9-苯基-2,3,7-三羥基-6-氧蒽酮/2,6,7-三羥基-9-苯基-6-熒光酮/9-苯基-2,3,7-三羥基-6-熒光酮/Phenylfluorone 質量規格:>95%,BR 包裝;5g

1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基吡唑啉酮/1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮/4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/萃取劑II/4-苯甲酰-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮/4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-2-吡唑-5-酮/HPMBP/PMBP 質量規格:>95%,BR 包裝;1g

1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮/依達拉奉/3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮/1,3,5-吡唑酮/1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮/苯基甲基氮茂-5-酮/2,4-二氫-5-甲基-2-苯基-3H-吡唑-3-酮/PMP 質量規格:>95%,BR 包裝;5g

1-苯基-3-吡唑烷酮/菲尼酮/菲尼酮A/3-甲基-1-苯基-吡唑啉-5-酮/1,3,5-吡唑酮/3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/1-苯基-3-吡唑啉酮/1-苯基-3-氧-1,2-二氮雜茂/1-苯基-3-吡唑酮/1-苯-3-吡唑啉酮/Phenidone 質量規格:>95%,BR 包裝;1g

α-萘酚苯甲醇/α-納富妥苯/4-[(4-羥基-1-萘基)苯基亞甲基]-1(4H)-萘酮/α-對萘酚苯/對萘酚苯甲醇/4,4’-(α-羥基亞芐基)二(1-萘酚)/α-萘酚基萘酚醌基苯甲烷/α-萘酚醌苯基甲烷/α-萘酚醌烷/α-萘酚苯/1-萘酚苯/α-Naphtholbenzein 質量規格:>95%,BR 包裝;5g

偶氮胭脂紅B/偶氮洋紅B/偶氮紅B/Azocarmine B 質量規格:>95%,BR 包裝;25g

偶氮胭脂紅G/酸性紅101/偶氮洋紅G/玫紅對氮蒽/偶氮紅G/羅星杜林/玫紅杜林/Azocarmine G 質量規格:>95%,BR 包裝;5g

硫堇/勞氏青蓮/勞氏紫/氯化-3,7-二氨基吩噻嗪/7-氨基-3-亞氨基-3H-苯并噻嗪氯化氫/3,7-二氨基吩噻嗪-5-翁氯化物/硫槿/氯化勞氏紫/Thionin 質量規格:>95%,BR 包裝;100g

酒石黃/肼黃/食用檸檬黃/酸性黃23/1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三鈉鹽/食用色素黃色5號/他特秦/ Tartrazine 質量規格:>95%,BR 包裝;25g

紅/6-羥基-5-[(2-甲氧基-5-甲基-4-磺本基)偶氮]2-萘磺酸二鈉鹽/紅AC/食品紅17/大紅貝司RC/顯色基艷紅RB/咖喱紅/紅 40 [CI 16035]/C.I.冰染重氮組分13/Allura Red AC 質量規格:>95%,BR 包裝;5g

日落黃/日落黃FCF/1-對磺酸苯基偶氮-2-羥基萘-6-磺酸二鈉鹽/食用黃色6號/食品黃3/食用桔黃/Sunset Yellow FCF 質量規格:>95%,BR 包裝;5g

麗絲胺羅丹明B/酸性羅丹明B/酸性紅52/二甲苯紅B/麗絲胺玫瑰紅B/里斯沙明玫瑰紅B200/李斯曼羅丹明B/李斯曼若丹明B/麗絲胺堿性蕊香紅B200/酸性玫瑰紅B/酸性桃紅B/柴林紅B/磺化羅丹明B/奇通紅S/硫羅丹明B /Lissamine rhodamine B 質量規格:>95%,BR 包裝;100g

酚番紅花紅/酚藏紅花/酚藏花紅/3,7-二氨基-5-苯基吩嗪翁氯化物/奎諾二甲基酯/Phenosafranine 質量規格:>95%,BR 包裝;25g
陰溝腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書Penicillium│sp. 中文名稱:青霉菌屬菌種種屬:Penicillium│sp.提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:抗丙肝病毒培養方法培養基:CM0014生長條件:28C存儲條件:液氮超低溫凍結;-80℃冰箱凍結 純度:98%

Nocardiopsis│kunsanensis 中文名稱:群山擬諾卡氏菌種屬:Nocardiopsis│kunsanensis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:模式菌株:培養方法培養基:CM0038生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98%

Streptomyces│collinus 中文名稱:山丘鏈霉菌種屬:Streptomyces│collinus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:CM0027生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:98%

Streptomonospora│halophila 中文名稱:嗜鹽鏈單孢菌種屬:Streptomonospora│halophila分離基物:鹽堿土提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:ISP4+10%NaCl生長條件:37C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98%

Byssochlamys│sp. 中文名稱:絲衣霉屬種屬:Byssochlamys│sp.提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:抗癌活性培養方法培養基:CM0014生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98%

Spicaria│sp. 中文名稱:穗霉屬種屬:Spicaria│sp.提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:抗癌活性培養方法培養基:CM0014生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:97%

Streptomyces│coeruleofuscus 中文名稱:天藍褐鏈霉菌種屬:Streptomyces│coeruleofuscus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:CM0027生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:97%

Chaetomium│murorum 中文名稱:突孢毛殼種屬:Chaetomium│murorum分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:CM0014生長條件:26C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:99%

 

產品相關關鍵字: 陰溝腸桿菌 PCR檢測試劑盒 50T
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