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 首頁>>產(chǎn)品展示>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>>匙形古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

匙形古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-27
點擊次數(shù):
798
產(chǎn)品特點:
匙形古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次匙形古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

匙形古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Cooperia punctata

貨號

 YSP96581

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
N-(*基硅基)二乙(>98.0%(GC))Phospho-PRAS40 (Thr246) (C77D7) Rabbit mAb硝基肉桂

N-*基硅基咪唑(>98.0%(T))Phospho-PRAS40 (Thr246) (C77D7) Rabbit mAb氯-2,4,5,6-四氟吡啶

N-*基硅基乙酰(>98.0%(GC))PKCι/λ (C83H11) Rabbit mAb2-氯-羥基吡啶

N-(*基硅烷基)二(>95.0%(GC))HA-Tag (6E2) Mouse mAb (HRP Conjuga)四氫噻喃-酮

二甲基氯硅烷(>95.0%(GC))Phospho-p95/NBS1 (Ser343) Antibody1,2-二甲基咪唑

1,1,3,四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))Phospho-p95/NBS1 (Ser343) Antibody5-甲基吡啶-酸

叔丁基二甲基氯硅烷(>98.0%(GC))p95/NBS1 Antibody3,5-雙三氟乙酰氯

1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))β-Arrestin 1 (D7Z3W) XP® Rabbit mAb2-氟-5-

N-(叔丁基二甲硅基)-N-甲基三氟乙酰(>95.0%(GC))β-Arrestin 1 (D7Z3W) XP® Rabbit mAb羥基環(huán)己烷甲酸

N,O-雙(叔丁基二甲硅基)乙酰(>95.0%(GC))Phospho-Thr-Pro-Glu (C32G12) Rabbit mAb2-基-

乙基二甲基氯硅烷(>97.0%(GC))Cystathionine γ-Lyase (D4E9J) Rabbit mAb2-溴-5-氯甲

1-(二甲基乙硅烷基)咪唑(>98.0%(T))Phospho-MAPKAPK-2 (Thr334) (27B7) Rabbit mAb羥基環(huán)己甲酸或乙酯

基二甲基氯硅烷(>99.0%(GC))Phospho-MAPKAPK-2 (Thr334) (27B7) Rabbit mAb(S)-2-甲基吡咯烷鹽酸鹽

二甲基異基氯硅烷(>90.0%(GC))DAPK1 Antibody1-丁基-甲基咪唑六氟酸鹽

1-(二甲基異基硅基)咪唑(>98.0%(T))Phospho-c-Abl (Tyr204) (C42B5) Rabbit mAb2,4,5-三咪唑

(溴甲基)二甲基氯硅烷(>95.0%(GC))SimpleChIP® Human WARS Intron 1 Primers2-氟-吡啶酸

1,雙(氯甲基)四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))Na,K-ATPase Antibody 2-氨基-6-甲氧基并噻唑

氯代(氯甲基)二甲基硅烷(>98.0%(GC))PI3 Kinase p110β (C33D4) Rabbit mAb2-溴-5-氯甲
匙形古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒貓游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒phospho-PAK1(Ser144)  酸化p21激活激酶1抗體1Kit

貓血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒phospho-PAK2(Ser141)  酸化p21激活激酶2抗體100 ul

貓?zhí)妓狒?(CA9)ELISA試劑盒Phospho-PAK2 (Ser20)  酸化p21激活激酶2抗體100 ul

貓嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒phospho-PAK3(Ser139)  酸化p21激活激酶3抗體100 ul

貓生長激素(GH)ELISA試劑盒phospho-PAK1/2/3(Thr423)  酸化p21激活激酶1/2/3抗體1 Kit

貓*狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒PAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7抗體100 ul

貓腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒FAM3A  胰腺衍生因子抗體100 ul

貓窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA試劑盒PAP2c  脂酸酸酶2C抗體100 ul

貓甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒PAR-1/Thrombin receptor  蛋白酶激活受體-1抗體300 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 匙形古柏線蟲 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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