產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:溶組織內阿米巴PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Entamoeba histolyticaPCR 編號:HE30925-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 鹽酸丫啶/鹽酸吖啶/吖啶鹽酸鹽/鹽酸氮(雜)蒽/Acridine hydrochloride 質量規格:鑒別 包裝;5g 鹽酸丫黃素/鹽酸吖啶黃/氯化-3,6-二氨基-10-甲基丫啶/三勝黃/丫黃素鹽酸鹽/錐黃/Acriflavine hydrochloride 質量規格:含量測定 包裝;1g 甲基橙/橙黃Ⅲ/金蓮橙D/對二甲基氨基偶氮苯磺酸鈉/4-[[4-(二甲氨基)苯基]偶氮基]苯磺酸鈉/酸性橙 52/半日花素B/Methyl orange 質量規格:鑒別 包裝;250mg 甲基紫/甲基青蓮/堿性紫1/甲基紫2B/紫/堿性紫1/甲紫/堿基青蓮/堿性紫2B/Methyl violet 質量規格:鑒別 包裝;5g 甲基紫6B/甲基青蓮6B/煌紫/亮紫/五甲基副品紅堿/Methyl violet 6B 質量規格:鑒別用 包裝;25g 溴甲酚紫/溴甲酚紅/二溴鄰甲酚磺呋酞/二溴鄰甲酚磺酞/二溴鄰甲酚磺酰酞/BCP 質量規格:含量測定 包裝;5g 溴甲酚紫鈉/溴甲酚紅鈉/5,5ˊ-二溴鄰甲酚磺酞鈉鹽/5,5′-二溴鄰甲酚紅鈉/5,5′-二溴鄰甲酚磺酰酞鈉/BCP,Na 質量規格:內標 包裝;50g 固紫醬GBC鹽/固深紅GBC/重氮色鹽紫醬/堅牢紫醬GBC鹽/熒光重氮色鹽紫醬/棗紅色基GBC/棗紅貝司GBC/紫醬色基GBC /固深紅GBC /堅牢醬紫GBC鹽/Fast Garnet GBC salt 質量規格:內標 包裝;25g 固黑K鹽/固黑K/固黑K半氯化鋅鹽/2,5-二甲氧基-4-[(4-基)偶氮]苯重氮(T-4)-四氯鋅酸鹽/耐曬黑K鹽/4-氨基-2,5-二甲氧基-4-硝基偶氮苯重氮鹽/Fast Black K Salt 質量規格:含量測定 包裝;5g 固鹽/黑色基B/4,4′二氨基二硫酸鹽/4,4'-二氨基二硫化物/耐曬鹽/4,4'-亞胺雙硫酸鹽/C.I.冰染重氮組分109/Fast Black B Salt 質量規格:>99%,AR 包裝;1g 固藍BB鹽/堅牢藍BB鹽/氯化-4-重氮-2,5-二乙氧基-N-苯甲酰基氯化鋅鹽/Fast blue BB salt 質量規格:含量測定 包裝;25g 固藍RR鹽/重氮堅牢藍/堅牢藍RR鹽/重氮固藍RR/4-苯甲酰氨基-2,5-二甲氧基氯化重氮苯氯化鋅鹽/耐曬蘭RR鹽/Fast blue RR salt 質量規格:含量測定 包裝;5g 氨基黑10B/萘酚藍黑/牛黑NBR/酸性黑1/藍黑/酸性黑10B/酸性藍黑10B/酸性青光藍10B/4-氨基-5-羥基-3-(對偶氮)-6-(苯偶氮)-2,7-萘二磺酸二鈉鹽/萘藍黑/對偶氮-3,6-二磺酸-1-氨基-8-萘酚-7-偶氮苯鈉鹽/Amino black 10B 質量規格:供含量測定用 包裝;1g 蘇丹Ⅳ/蘇旦IV/四號蘇丹紅/猩紅/鄰甲苯偶氮鄰甲苯偶氮-3-萘酚/油溶暗紅/溶劑紅24/蘇丹紅B/1-[4-(鄰甲苯偶氮)鄰甲苯偶氮]-2-萘酚/1-(2-甲基-4-(2-甲基苯基偶氮)苯基偶氮)-2-萘酚/鄰甲苯偶氮鄰甲苯偶氮-2-萘酚/油溶紅/燭紅/Sudan Ⅳ 質量規格:內標 包裝;5g 蘇丹Ⅲ/三號蘇丹紅/黃光油溶紅/油紅/苯基偶氮(4-偶氮-1)-2-萘酚/蘇旦Ⅲ/蘇丹紅Ⅲ/1-[4-(苯基偶氮)苯基偶氮]-2-萘酚/溶劑紅23/Sudan Ⅲ 質量規格:含量測定 包裝;250g 蘇丹Ⅱ/溶劑橙7/蘇旦Ⅱ/2,4-二甲基苯(1-偶氮-1)-2-羥基萘/2,4-二甲基苯偶氮-2′-萘酚/二號蘇丹紅/油溶猩紅/黃光油溶橙/1-[(2,4-二甲苯基)偶氮]-2-萘酚/蘇丹紅II/蘇丹橙Ⅱ/1-二甲苯基偶氨-2-萘酚/Sudan Ⅱ 質量規格:含量測定 包裝;100g 蘇丹I/蘇旦I/苯基(偶氮-1)-2-羥基萘/一號蘇丹紅/苯基偶氮-2-萘酚/苯偶氮苯酚/溶劑黃14/1-(苯基偶氮)-2-萘酚/油溶黃/苯基(偶氮-1)-2-羥基萘/Sudan I 質量規格:含量測定 包裝;25g 溶組織內阿米巴PCR檢測試劑盒說明書Pasteurella│pneumotropica 中文名稱:嗜肺巴氏桿菌種屬:Pasteurella│pneumotropica分離基物:兔肝臟病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究培養方法培養基:56生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:97% Streptococcus│bovis 中文名稱:牛鏈球菌種屬:Streptococcus│bovis分離基物:牛脾臟病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究培養方法培養基:396生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法; 純度:97% Alphaherpesvirinae│Infectious bovine rhinotracheitis virus 中文名稱:傳染性牛鼻氣管炎病毒種屬:Alphaherpesvirinae│Infectious bovine rhinotracheitis virus分離基物:鼻腔棉拭子安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究和分類培養方法生長條件:37存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法; 純度:98% Mannheimia│haemolytica 中文名稱:溶血性曼氏桿菌種屬:Mannheimia│haemolytica分離基物:病豬肺臟提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:用于科研培養方法培養基:0生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98% Avipoxvirus│Fowlpox virus 中文名稱:雞痘病毒種屬:Avipoxvirus│Fowlpox virus分離基物:病雞結痂提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究培養方法培養基:0生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98% Influenzavirus A│Avian influenza virus 中文名稱:禽流感病毒種屬:Influenzavirus A│Avian influenza virus分離基物:病雞提供形式:凍結物安全等級:2模式菌株:no應用領域:實驗研究其生物學活性,并進一步從基因平上進行分析。培養方法培養基:0生長條件:37 純度:98% Streptococcus│suis 中文名稱:豬鏈球菌種屬:Streptococcus│suis分離基物:病豬提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:抗藥性檢驗培養方法培養基:396生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98% Riemerella│anatipestifer 中文名稱:鴨疫里氏桿菌種屬:Riemerella│anatipestifer分離基物:鴨心血安全等級:2模式菌株:no應用領域:科研教學培養方法培養基:0生長條件:37存儲條件:真空冷凍干燥法; 純度:98% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |