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犬皰疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-28
點擊次數(shù):
780
產(chǎn)品特點:
犬皰疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
  50次犬皰疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

樣品RNA的抽提:
產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質(zhì)量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

 產(chǎn)品名稱

犬皰疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Canine Herpes Virus

 貨號

 YSP96510

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
溴菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,基體:石油)F4/80 (BM8.1) Rat mAb (APC-Cy7® Conjuga)2-氯-5-基酸

草萘(標(biāo)準(zhǔn)品)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbCHLORO-5-BUTOXYPHENYLBORONIC ACID, PINACOL ESR

除蟲脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%,基體:酮)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb2,二氯-1-

除蟲脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)ST14/Matriptase Antibody環(huán)己基-D-氨酸水合物

2,滴酸(標(biāo)準(zhǔn)品)BST2 (D5V5Z) Rabbit mAb基二硫

2,滴酸(98%)Arginase-2 Antibody甲基吲哚-2-甲

二噻農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)PCSK7 (D4I5G) Rabbit mAb2,5-二(基)-1,3,惡二唑

棉隆(標(biāo)準(zhǔn)品)HELQ (D4K2O) Rabbit mAb2-氟-6-(三氟甲基)

雙氯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Di-Methyl-RPL29 (Lys5) (D8T9P) Rabbit mAb甲基酰氧基基三乙氧基硅烷

異凈(標(biāo)準(zhǔn)品)Cas9 (<i>S. pyogenes</i>) (E7M1H) XP® Rabbit mAbNα-(叔丁氧羰基)-L-色氨酸 N-琥珀酰亞酯

異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)Cas9 (<i>S. pyogenes</i>) (E7M1H) XP® Rabbit mAb氯-2,6-二氟酸

異氯(標(biāo)準(zhǔn)品)Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5-RT-BUTYL-(NITROPHENYL)-1,2,OXADIAZOLE

1,二氯-d4(標(biāo)準(zhǔn)品)MEKK2 Antibody(CHLORO-METHYLPHENYL)-1H-1,2,TRIAZOL-5(4H)-ONE

2,2,3,3,4,4,5,56,6-十溴代-1,1-聯(lián)(標(biāo)準(zhǔn)品)Androgen Receptor (AR-V7 Specific) (E3O8L) Rabbit mAb4,4'-亞甲基雙(2,6-二甲基)酚

二環(huán)戊二環(huán)氧化物(97%)Cystathionine γ-Lyase (D1N1D) Rabbit mAb鄰芐基

1,2-二氯乙烷(standard for GC,>99.9%(GC))CD16A (D8W2O) Rabbit mAb吡啶

1,2-二氯乙烷(for HPLC,≥99.9%)Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)2,二氟-6-酚

1,2-二氯乙烷標(biāo)準(zhǔn)熔液(1.00mg/ml,基體:甲)Phospho-STING (Ser366) (D7C3S) Rabbit mAb雙(2,4,6-三)草酸酯
犬皰疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒白介素3(IL-3)ELISA試劑盒IRF7  干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體100 ul

白介素2誘導(dǎo)的T細(xì)胞激酶(ITK)ELISA試劑盒Phospho-IRF7 (Ser471/472)  酸化干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體100 ul

白介素2受體(IL2R)ELISA試劑盒IRS P53  胰島素受體底物p53蛋白抗體100 ul

白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒IRS1  胰島素受體底物-1抗體20 ul

白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒phospho-IRS1(Ser307)  酸化胰島素受體底物-1抗體100 ul

白介素29(IL-29)ELISA試劑盒phospho-IRS1(Ser1101)  酸化胰島素受體底物-1抗體250 ml

白介素28B(IL-28B)ELISA試劑盒phospho-IRS1(Ser302)  酸化胰島素受體底物-1抗體25 ml

白介素28A(IL-28A/IFN-λ2)ELISA試劑盒phospho-IRS1(Ser332/336)  酸化胰島素受體底物-1抗體5 mg

白介素26(IL-26)ELISA試劑盒phospho-IRS1(Ser612)  酸化胰島素受體底物-1抗體5 mg

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 犬皰疹病毒 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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