產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒規格 英文名稱:Pasteurella spp.PCR 編號:HE31356-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 增強型DAB顯色試劑盒(20×) 3ml 別名 增強型DAB顯色試劑盒(20×)英文名稱 Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20×儲存條件 -20℃,避光,有效期1年單位 瓶 產品簡介: 增強型 DAB 顯色試劑盒是一種借助辣根過氧化物酶(HRP) ,用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜顯色的試劑盒。 DAB(二氨基聯)是辣根過氧化物酶的常用底物。在 辣根過氧化物酶的催化下,DAB 會產生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本產品采用特殊配方,靈敏度高,背景低,重復性好,儲存穩定,使用方便,適合于蛋白印跡、免疫組織 化學和免疫細胞化學、斑點印跡和生物芯片等的染色和顯色反應。 操作說明: 1. 對于組織切片或蛋白質印記膜,在與辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適 當洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5 分鐘?!?. 向 5 ml 蒸餾水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C,并混合均勻,即為 DAB 工作液,1h 內使用。注意:溶液 A/B/C 必須*融化后使用?!?. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液,確保能充分覆蓋樣品?!?. 室溫避光孵育 1-30 分鐘,顯色時間過長可引起本底增高,故應密切觀察顯色過程(一般 3-10 分鐘理想), 并在本底較淺且達到適當顯色強度時以流水漂洗終止顯色反應。 5. 對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后可對其進行其他染料復染。對于膜,顯色反應終止后,可以室 溫晾干避光保存?!?/span> 3MM濾紙 Whatman 27cm×100m 單位 張whatman原裝3mm層析濾紙。實驗室相關耗材。 3MM濾紙 Whatman-3MM層析濾紙 3030-704 規格27cm×1m 27cm×100m PVDF膜(0.22um)Millipore 26.5*3.75 單位 卷英文名稱 Immobilon-PSQ PVDF,0.2 µm科研實驗用耗材。 PVDF膜(0.45um)13.25*15cm 13.25*15 單位 張英文名稱 Immobilon-P PVDF,0.45 µm科研實驗用耗材。 麗春紅S 10g 有效期 2年級別 BS Grade別名 猩紅S;Fast ponceau 2B;Ponceau Sextra英文名稱 Ponceau SCAS 6226-79-5分子式 C22H12N4Na4O13S4分子量 760.61儲存條件 RT外觀(性狀) 深紅色粉末單位 瓶說明:麗春紅(Ponceau S)也稱猩紅,可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纖維素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的檢測。麗春紅帶負電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結合,同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區相結合,從而形成紅色的條帶。麗春紅染色的靈敏度不及考馬斯亮藍染色。麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS或其它適當溶液洗去。因此,蛋白質N端測序時將SDS-PAGE膠上的蛋白轉移到PVDF膜,用麗春紅染色后將目的條帶切下用于測序?!?/span> 巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒規格 激活素受體樣激酶1抗體3'-Demethoxypiplartine別名: 分子式: C16H17NO4性狀: Powder純度: 95.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫 激活素A受體1B抗體Cyclo(D-Val-L-Pro)別名: 分子式: C10H16N2O2性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫 磷化雄激素受體抗體Cyclo(L-Ala-L-Pro)別名: Cyclo(alanylprolyl)分子式: C8H12N2O2性狀: Oil純度: 96.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 對照品;標準品;微生物代謝產物;天然產物;天然產物庫 磷化A-Raf抗體Cyclo(D-Phe-L-Pro)別名: 分子式: C14H16N2O2性狀: Oil純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 對照品;標準品;微生物代謝產物;天然產物;天然產物庫 酰基鞘氨脫酰酶2抗體5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one別名: 分子式: C5H7NO性狀: Oil純度: 96.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫 脂肪細胞特異性粘附分子抗體3-(4-Methoxyphenyl)-1-(pyrrol-1-yl)propan-1-one別名: 分子式: C14H15NO2性狀: Cryst.純度: 96.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫 腺相關病毒5抗體Cyclo(L-Leu-trans-4-hydroxy-L-Pro)別名: 分子式: C11H18N2O3性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫 腺苷活化蛋白激酶γ3抗體3-Phenyl-1-(pyrrol-1-yl)propan-1-one別名: 分子式: C13H13NO性狀: Cryst.純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |