特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產品名稱 | 匙狀*毛樣線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Nematodirus spathiger | 貨號 | YSP97001 |
熒光染料的優(yōu)點: 產品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產物結合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產物會影響結果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數與PCR產物的數量成正比,因此,根據PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數量。 TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術的缺點: 成本高; 設計難度大; 只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環(huán)數的增加,終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據終的PCR產物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 CXorf6 英文名稱: X染色體開放閱讀框6抗體 0.1ml Anti-Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Egr1 英文名稱: 早期生長應答蛋白1抗體 0.1ml P-糖蛋白 Anti-P-GP 0.1mlinterferon gamma inducing factor,MIGF ELISA 720mgHPLC≥98% 柚皮苷;柑橘甙,異橙皮甙Naringin10236-47-220mgHPLC≥98% 柚皮素;4'',5,7-三羥基黃酮;;柚皮苷元;柑橘素Naringenin480-41-120mgHPLC≥98% 羽扇豆醇Lupeol545-47-120mgHPLC≥98% 大鼠脂聯素(ADP)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat adiponectin,ADP ELISA Kit 大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat Fatty acyl-CoA synthetase,ACS ELISA Kit 大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat neutrophil elastase,NE ELISA Kit 大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat neutrophil activating protein-2,NAP-2 ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat Tumor necrosis factor α,TNF-α? Anti-phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 熒光素標記酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh phospho-Myosin light chain(Ser20) 酸化肌球蛋白輕鏈抗體 規(guī)格 0.1ml MMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質蛋白酶-14Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg C17orf74 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml Anti-OPGL/ODF 骨保護蛋白配體抗體(破骨細胞分化因子)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-Phospho-Numb (Ser276) 酸化膜相關蛋白Numb抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh IFN gamma 干擾素-γ抗體 規(guī)格 0.1ml MOG ELISA Kit (human) 抗髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白(人) 96T Prostatic Acid Phosphatase 英文名稱: 前列腺酸性酸酶抗體 0.2ml 核酮糖-1,5-二酸羧化酶/加氧酶 (Large Chain) 單克隆抗體Rubisco (Large Chain) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul TATA結合蛋白 單克隆抗體TBP/TATA Binding Protein Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 親環(huán)素B 單克隆抗體Cyclophilin B Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul Desmin 單克隆抗體Desmin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 親環(huán)素B 單克隆抗體Cyclophilin B Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul TATA結合蛋白 單克隆抗體TBP/TATA Binding Protein Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 匙狀*毛樣線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒卷曲螺旋結構域蛋白37抗體Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記腫瘤抑素抗體IgG1 Kit 卷曲螺旋結構域蛋白47抗體TWIST proin/FITC 熒光素標記TWIST轉錄因子蛋白抗體IgG100 ul 卷曲螺旋結構域蛋白17抗體Rabbit human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標記可溶性纖維蛋白原抗體IgG20 ul 卷曲螺旋結構域蛋白58抗體Rabbit human Fibrinogen/FITC 熒光素標記纖維蛋白原IgG100 ul 卷曲螺旋結構域蛋白94抗體Goat human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗纖維蛋白原100 ul 卷曲螺旋結構域蛋白82抗體TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標記酪氨酸羥化酶抗體IgG1 ml CDK5激活結合蛋白2抗體TNK1/FITC 熒光素標記非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgG100 ul CDK2相互作用蛋白抗體Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標記酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgG1Kit 周期蛋白依賴性激酶14抗體Phospho-Tyk2 (Tyr1054/1055)/FITC 熒光素標記酸化非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體IgG100 ul 豬脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒5-HTT 5-羥色胺轉運蛋白抗體100 ug鮑肌肉癥病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒 |