產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:鴨源雞桿菌PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Gallibacterium anatisPCR 編號:HE31017-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 草酸鉀/乙二酸鉀/草酸二鉀一合物/Potassium oxalate monohydrate 質量規格:100mg/L,基體: 5%HNO3 包裝;1g 硬脂酸鉀/十八酸鉀/Potassium stearate 質量規格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 包裝;5g 四草酸鉀/四乙二酸鉀/草酸三氫鉀/二草酸三氫鉀/三氫二草酸鉀二合物/Potassium tetraoxalate dihydrate 質量規格:100µg/mL,基體:1%HNO3 包裝;1g 草酸鈦鉀/乙二酸鈦鉀/雙草酸氧化鈦(IV)酸鉀二合物/Potassium titanyl oxalate dihydrate 質量規格:1000μg/ml 包裝;25g 四苯硼鉀/四苯硼化鉀/四苯基硼酸鉀/Potassium tetraphenylborate 質量規格:1000μg/ml,溶劑: 包裝;5g 氯鉑酸鉀/氯化鉑鉀/氯鉑(IV)酸鉀/氯高鉑化鉀/六氯鉑酸鉀/(OC-6-11)六氟合鉑酸(2-)鉀/六氯鉑(IV)酸鉀/六氯鉑鉀/(OC-6-11)六氟合鉑酸鉀/Potassium platinic chloride 質量規格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 包裝;100g 氯亞鉑酸鉀/氯亞鉑酸鉀/氯化亞鉑鉀/四氯亞鉑酸鉀/四氯鉑酸鉀/氯亞鉑化鉀/四氯鉑(II)酸鉀/Potassium chloroplatinite 質量規格:100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液 包裝;500g 溴酸鉀/Potassium bromate 質量規格:1000μg/ml,基質:2.0mol/L鹽酸 包裝;100mg 亞碲酸鉀/碲(IV)酸鉀/亞蒂酸鉀/Potassium lurite 質量規格:500mg/L,溶劑:1%硝酸 包裝;20mg /四氫硼鉀/鉀硼氫/鉀氫化硼/氫硼化鉀/四氫硼酸(1-)鉀/Potassium borohydride 質量規格:100µg/mL,基體:1%HCl 包裝;100g 丁二酮肟/二甲基乙酰肟/丁二酮二肟/二乙二肟/丁二肟/雙乙酮肟/鎳試劑/二乙酰二肟/二甲基乙二醛肟/二甲基乙二肟/2,3-丁二酮二肟/Dimethylglyoxime 質量規格:1000µg/mL,基體:10%HCl 包裝;25g 二乙酰一肟/2,3-丁二酮一肟/聯乙酰一肟/雙乙酰一肟/甲基肟乙/丁二酮單肟/2,3-丁二酮肟/2,3-丁烷二酮一肟/肟乙/丁二酮一肟/二甲基乙二酰一肟/Diacetyl monoxime 質量規格:1000μg/ml,基體:0.1mol/LNaOH 包裝;1g 肟/β-異亞硝基丙烷/二甲基酮肟/2-肟/Acetoxime 質量規格:1000μg/ml 包裝;25g 環戊酮肟/Cyclopentanone oxime 質量規格:1000μg/ml 包裝;5g 楊醛肟/鄰羥基肟/2-羥基肟/柳醛肟/Salicylaldoxime 質量規格:1000µg/mL,基體:10%HCl 包裝;1g 8-羥基喹啉/8-氫氧化喹啉/8-羥基氮(雜)萘/鄰羥基氮(雜)萘/8-羥基氮萘/喔星/8-羥基氮雜萘/喹啉醇/8-Hydroxyquinoline 質量規格:1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3 包裝;1g 2,9-二甲基-1,10-菲羅啉/2,9-二甲基鄰菲啰啉/新銅試劑/2,9-二甲基-1,10-鄰菲羅啉/2,9-二甲基-1,10-鄰菲洛啉/Neocuproine 質量規格:1000μg/ml in 10% HCl 包裝;25g 鴨源雞桿菌PCR檢測試劑盒說明書Pichia│onychis 中文名稱:指甲畢赤酵母種屬:Pichia│onychis分離基物:生物樣/石鰈魚 胃提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:共生微生物/魚類共生菌培養方法培養基:513生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:99% Candida│zeylanoides 中文名稱:涎沫假絲酵母種屬:Candida│zeylanoides分離基物:生物樣/狼魚 腸提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:共生微生物/魚類共生菌培養方法培養基:513生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:99% Candida│inconspicua 中文名稱:平常假絲酵母種屬:Candida│inconspicua分離基物:生物樣/海藻提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:共生微生物/藻類共生菌培養方法培養基:513生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:99% Filobasidium│uniguttulatum 中文名稱:線黑粉菌種屬:Filobasidium│uniguttulatum分離基物:生物樣/蜈蚣藻提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:共生微生物/藻類共生菌培養方法培養基:513生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:95% Hanseniaspora│uvarum 中文名稱:葡萄有孢漢遜酵母種屬:Hanseniaspora│uvarum分離基物:生物樣/海藻提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:生物轉化微生物/蛋白含量高培養方法培養基:513生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:95% Pichia│sp. 中文名稱:畢赤酵母種屬:Pichia│sp.分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:潛在的有機污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養方法培養基:821生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥97%, ee 98% Candida│viswanathii 中文名稱:維斯假絲酵母種屬:Candida│viswanathii分離基物:樣/海提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:降解柴油及原油培養方法培養基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥97%, ee 98% Kocuria│sp. 中文名稱:考克氏菌種屬:Kocuria│sp.分離基物:沉積物/箱式沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產酶微生物/產淀粉酶、過氧化氫酶;未檢測到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、瓊脂酶培養方法培養基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |