產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:長雙歧桿菌PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Bifidobacterium longumPCR 編號:HE30697-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 哈爾滿生物堿標準品試劑盒 HARMANE ALKALOIDS STANDARDS KIT(RG) 質量規格:>98%,BR 包裝;5g 生姜標準品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) 質量規格:>98%,BR 包裝;10g 生姜標準品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) 質量規格:>99%,標準品 包裝;5g 大蒜臭氣標準品試劑盒 GARLIC STENCH STANDARDS KIT(SG) 質量規格:>98%,BR 包裝;1g 大蒜標準品試劑盒 GARLIC STANDARDS KIT(SH) 質量規格:BS 包裝;25g 紅景天標準品試劑盒 GOLDENROOT (RHODIOLA ROSEA) STANDARDS KIT(P) 質量規格:>97%(HPLC),BC 包裝;5g 紅景天標準品試劑盒 GOLDENROOT (RHODIOLA ROSEA) STANDARDS KIT(P) 質量規格:>98%,BR 包裝;25g 北美黃蓮標準品試劑盒 GOLDENSEAL STANDARDS KIT(P) 質量規格:>98%,BR 包裝;5g 沒藥甾酮標準品試劑盒 GUGGULSTERONES STANDARDS KIT(P) 質量規格:>98%,BC 包裝;100ml 沒藥甾酮標準品試劑盒 GUGGULSTERONES STANDARDS KIT(P) 質量規格:BC 包裝;25ml 積雪草標準品試劑盒 GOTU KOLA STANDARDS KIT(P) 質量規格:BC 包裝;1g 積雪草標準品試劑盒 GOTU KOLA STANDARDS KIT(P) 質量規格:>99%,BR 包裝;25g GOLDTHREAD(COPTIS) STANDARDS KIT(P) 質量規格:>98%,BR 包裝;5g 葡萄多酚標準品試劑盒 GRAPE POLYPHENOLICS(STILBENES) STANDARDS KIT(P) 質量規格:>98%,BR 包裝;250mg 葡萄多酚標準品試劑盒 GRAPE POLYPHENOLICS(STILBENES) STANDARDS KIT(P) 質量規格:>99%,BR 包裝;1g 葡萄糖胺標準品試劑盒 GLUCOSAMINE STANDARDS KIT(RG) 質量規格:>98%,BR 包裝;250mg 刺五加苷標準品試劑盒# 2 ELEUTHEROSIDE STANDARDS KIT #2(P) 質量規格:BR 包裝;25g 長雙歧桿菌PCR檢測試劑盒說明書Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus 中文名稱:德氏乳桿菌保加利亞亞種種屬:Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus提供形式:凍干管;1mL菌液;安全等級:1模式菌株:no應用領域:酸奶培養方法培養基:MRS培養基::酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:37℃,厭氧。生長特性G+,菌體長桿狀,兩端鈍圓,鏈狀排列,無芽胞,有異染粒。菌落圓形,表面粗糙,突起,邊緣整齊,淺黃色,不透明。發酵葡萄糖、果糖,不發酵木糖、蔗糖、阿拉伯糖。從葡萄糖酸鹽產酸,接觸酶陰性,牛奶反應產酸、酸凝,兼性厭氧。15℃不生長,45℃生長。產乳酸。存儲條件:2-8℃冷藏 純度:99% Acetobacter sp. 中文名稱:醋酸菌種屬:Acetobacter sp.提供形式:凍干管,斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:氧化乙醇產醋酸培養方法培養基:醋酸菌培養基::Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (瓊脂) 15g Distilled water (蒸餾) 1000ml Adjust (調) pH to 6.8傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:30℃,好氧存儲條件:2-8℃冷藏 純度:99% Agrobacteriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn 中文名稱:發根土壤桿菌(發根植物單胞菌)種屬:Agrobacteriumrhizogenes(Rikeretal.)Conn安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:9生長條件:25-28℃ 純度:≥98% Lactobacillus plantarum 中文名稱:植物乳桿菌種屬:Lactobacillus plantarum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究;分析檢測。檢測煙酸、泛酸、生物素。培養方法培養基:MRS培養基::酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。生長條件:37℃,微好氧存儲條件:2-8℃ 純度:97% Alcaligenes│faecalis 中文名稱:蔥頭伯克氏菌種屬:Alcaligenes│faecalis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:化妝品抗菌培養方法培養基:CM0002生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97% IymomonasmobilisKluyverandVanNiel 中文名稱:運動發酵單孢菌種屬:IymomonasmobilisKluyverandVanNiel安全等級:1模式菌株:no應用領域:產灑精培養方法培養基:53生長條件:30℃半厭氧培養 純度:97% Micrococcus│lysodeikticus 中文名稱:溶壁微球菌種屬:Micrococcus│lysodeikticus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:溶菌試驗培養方法培養基:CM0002生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:96% Streptococcus│faecalis 中文名稱:糞鏈球菌種屬:Streptococcus│faecalis提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于測定各類氨基酸。培養方法培養基:CM0500生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:96% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |